PEI25K是一種功能強(qiáng)大、值得信賴且具有成本效益的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中,PEI提供始終如一的高基因表達(dá)(96孔板至100L生物反應(yīng)器)。由于Polysciences PEI在科研工作中凸顯關(guān)鍵優(yōu)勢(shì),致使轉(zhuǎn)向此試劑的使用者與公司逐年增多。相對(duì)于其他選擇,使用PEI在內(nèi)部制備轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低40%。在學(xué)習(xí)polysciences 23966-1使用方法之前我們先了解一下產(chǎn)品屬性吧!
一、產(chǎn)品屬性
CAS Number:9002-98-6, 26913-06-4
分子式:(CH2CH2NH)n
外觀:白色至黃色固體
熔點(diǎn):73-75o
分子量:25000
溶解性:熱水、低pH冷水、甲醇和乙醇
不溶于:苯、yi醚和丙酮
二、使用方法
材料:1g PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(23966-1)、1L 純水、12 M鹽酸、10M氫氧化鈉、一次性 0.1-0.2µm PES 真空無(wú)菌過(guò)濾器、無(wú)菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
器材:1 L 玻璃燒杯、1 L 玻璃量筒、核準(zhǔn) pH 計(jì)、2 支 1 mL 塑料移液管、托盤(pán)、聚四氟yi烯(PTFE)攪拌棒、真空泵配制過(guò)程:
1. 取1g PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(23966-1)溶于900ml水中;
2. 加熱到60-80℃并攪拌;
3. 加入HCl,調(diào)節(jié)PH 2.0;
4. 蓋上燒杯,攪拌3h,直到PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(23966-1)粉末wan全溶解為止;
5. 冷卻,直至室溫;
6. 再加入NaOH ,調(diào)節(jié)pH 6.9-7.1;
7. 將調(diào)節(jié)好的溶液移到量筒中,加水至1L;
8. 真空過(guò)濾消毒;
9. 將消毒好的溶液進(jìn)行分裝,分裝好的溶液在-20°C下 保存。
備注:加熱/加酸都有利于 PEI 溶解。加酸的時(shí)候注意用量,多次少量,達(dá)到PEI wan全溶解即可。
試劑儲(chǔ)存:冷凍部分溶液可在-20°C 保存長(zhǎng)達(dá)一年;部分解凍的溶液可在 4°C 保存2 周,注意不可反復(fù)凍融。
粉末儲(chǔ)存:未開(kāi)封的粉末有效期兩年??稍谑覝叵卤4嬷敝潦褂谩?/span>
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